中國科學(xué)院廣州地球化學(xué)研究所李繼兵副研究員、羅春玲研究員等科研人員，研究發(fā)展了MMI-SIP-RACS技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了單細(xì)胞水平上對(duì)PAHs降解微生物的原位富集、識(shí)別和分離。相關(guān)研究近日以副封面文章的形式發(fā)表于《環(huán)境科學(xué)與技術(shù)》(Environmental Science & Technology)雜志。

傳統(tǒng)的DNA-穩(wěn)定同位素探針(DNA-SIP)技術(shù)，可識(shí)別真實(shí)環(huán)境中發(fā)揮降解作用的功能微生物。但是，DNA-SIP技術(shù)只能獲得功能微生物的部分DNA信息，從群落水平上解析其物種組成，難以做到單一功能微生物的分離，無法對(duì)功能基因和代謝通路進(jìn)行研究。這限制了這些具有降解功能的微生物在環(huán)境污染治理中的應(yīng)用。在此背景下，如何錨定并精準(zhǔn)分選功能微生物細(xì)胞，獲取基因組信息，進(jìn)而揭示其代謝特征、挖掘其原位修復(fù)潛力，已成為環(huán)境微生物研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。

研究人員嘗試將磁性納米顆粒介導(dǎo)分離技術(shù)(MMI)、DNA-SIP和單細(xì)胞拉曼分選(RACS)技術(shù)聯(lián)用，發(fā)展了MMI-SIP-RACS技術(shù)。他們以石油污染水體中的菲為研究對(duì)象，運(yùn)用MMI技術(shù)富集降解功能微生物細(xì)胞，借助SIP和RACS技術(shù)鎖定和分離目標(biāo)微生物細(xì)胞，進(jìn)而在單細(xì)胞水平上探索了這些細(xì)胞的遺傳特征及降解機(jī)制。

該研究顯示，MMI-SIP-RACS顯著富集了菲降解菌，并實(shí)現(xiàn)了代表性功能微生物單細(xì)胞的有效分離。SIP擴(kuò)增子測序、拉曼光譜中單細(xì)胞的13C移位及單細(xì)胞基因組測序等結(jié)果，綜合證實(shí)新鞘脂菌(Novosphingobium sp.)是參與污水中原位降解菲的功能微生物。

該研究并成功重建了Novosphingobium微生物細(xì)胞的菲代謝途徑，解析了菲雙加氧酶(Phn)、萘雙加氧酶(Nah)基因等多個(gè)新型PAHs降解基因。

該研究所研發(fā)的MMI-SIP-RACS新方法，實(shí)現(xiàn)了單細(xì)胞水平上對(duì)PAHs降解微生物的原位富集、識(shí)別和分離，并將特定微生物細(xì)胞的功能與基因型直接聯(lián)系起來，是有效分離真實(shí)環(huán)境中有機(jī)污染物降解微生物細(xì)胞的新工具。

該研究工作得到國家自然科學(xué)基金、廣東省重點(diǎn)領(lǐng)域研發(fā)計(jì)劃、廣州地化所“涂光熾優(yōu)秀青年學(xué)者”(A類)等項(xiàng)目的聯(lián)合資助。(作者：朱漢斌)

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關(guān)鍵詞： 科研人員 單細(xì)胞水平 PAHs降解微生物 功能微生物